A citometria de fluxo é uma técnica de diagnóstico e pesquisa conhecida há muitos anos e amplamente utilizada em oncologia. A citometria de fluxo permite que as células que compõem a suspensão em uma corrente líquida laminar ou estratificada sejam examinadas com um dispositivo chamado citômetro de fluxo. Quais as indicações da citometria de fluxo e como é feita?
A citometria de fluxoé utilizada no diagnóstico das neoplasias hematológicas por serem tumores líquidos, mas é apenas um método auxiliar. No entanto, vale lembrar que existe um câncer que só pode ser diagnosticado com esse método. Isso é leucemia linfocítica crônica.
Em outras doenças neoplásicas, a citometria de fluxo é usada como auxílio diagnóstico, pois mostra características muito importantes das células neoplásicas. Este método também é utilizado para avaliar a eficácia do tratamento aplicado.
Citometria de fluxo - o que mostra?
O fluxo de líquido contendo as partículas de teste flui a uma velocidade constante (100-2000 partículas por segundo) através da área de medição do citômetro. Aqui, métodos ópticos são usados para analisar formas, dimensões, estrutura interna das células e seu conteúdo, por exemplo, DNA. Todas as células são marcadas opticamente.
As propriedades de dispersão da luz do laser por células individuais ou seus componentes (núcleos, cromossomos, mitocôndrias) ou a fluorescência induzida por eles são usadas para medições.
Os sinais ópticos são convertidos em sinais elétricos que, após análise, são apresentados graficamente na forma de distribuições mono ou biparamétricas.
O citômetro também permite a segregação de partículas após sair da zona de medição. Pode-se dizer que o aparato organiza (segrega) células com os mesmos elementos constituintes (classificação preparativa) ou extrai tipos específicos de células (classificação analítica).
A citometria de fluxo permite o estudo de características populacionais de células, análise de componentes celulares (especialmente como ácidos nucleicos, proteínas, antígenos de superfície e celulares), atividade enzimática, potencial de membrana, atividade mitocondrial, pH intracelular, transporte de íons e fluidez da membrana.
Citometria de fluxo - aplicação
Usado em diagnósticosA citometria de fluxo permite determinar o fenótipo das células neoplásicas e a expressão de proteínas individuais. Para isso, são usados anticorpos marcados fluorescentes que se ligam de maneira característica a antígenos na superfície da membrana celular. Graças a isso, é possível determinar o grau de sua diferenciação, origem, marcadores prognósticos e terapêuticos, que facilitam a decisão sobre outros procedimentos diagnósticos e terapêuticos.
Outra aplicação da citometria de fluxo é o monitoramento da eficácia do tratamento aplicado, avaliando os chamados "doença residual", que é a porcentagem de células com fenótipos tumorais que permanecem após o tratamento.
A citometria de fluxo também facilita a pesquisa do câncer. Graças a esse método, é possível buscar, por exemplo, receptores que estão na superfície das células neoplásicas e podem se tornar alvo de tratamento.
O método permite avaliar a atividade das proteínas dentro da célula. Também é possível avaliar o ciclo celular, por exemplo, determinando a quantidade de DNA na célula.
No curso da proliferação, uma célula passa por fases no ciclo celular em que dobra a quantidade de DNA. Avaliando essa quantidade, é possível indicar em que fase as células estão, se estão proliferando ou não, ou se estão entrando em apoptose. Ou seja, com a ajuda da citometria de fluxo você pode descobrir se as células estão se preparando para a apoptose, que é o processo de morte programada.
Citometria de fluxo - o futuro
A citometria de fluxo é conhecida e utilizada na medicina há várias dezenas de anos. No entanto, está em constante aprimoramento e cria novas possibilidades de diagnóstico e pesquisa. No primeiro período de uso desse método, só foi possível determinar o tamanho e o grau de granularidade das células.
O uso de luz laser em dispositivos de citometria de fluxo permite excitar determinados marcadores fluorescentes e então avaliar sua emissão. Os citômetros modernos permitem um aumento significativo no número de marcadores avaliados de uma só vez, o que definitivamente se traduz em um aumento na sensibilidade desse método.
Por isso é usado não só para diagnosticar doenças neoplásicas, mas também para avaliar a eficácia do tratamento.
Sobre o autor
Anna JaroszJornalista que há mais de 40 anos atua na popularização da educação em saúde. Vencedor de vários concursos para jornalistas que lidam com medicina e saúde. Ela recebeu, entre outros O "Golden OTIS" Trust Award na categoria "Mídia e Saúde", St. Kamila premiada na ocasiãoDia Mundial do Doente, duas vezes "Crystal Pen" num concurso nacional para jornalistas promotores da saúde, e muitos prémios e distinções em concursos para o "Jornalista Médico do Ano" organizado pela Associação Polaca de Jornalistas da Saúde.
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